消毒產(chǎn)品真菌殺滅試驗(yàn) 抑菌環(huán)試驗(yàn)測(cè)試

抗菌檢測(cè)方法

1、抗真菌試驗(yàn)法

該方法是以真菌為對(duì)象的檢測(cè)方法，基本原則是在樣品和培養(yǎng)基上均勻噴灑一定量的混合孢子懸液，培養(yǎng)一段時(shí)間后，觀察標(biāo)本中的霉菌，對(duì)照真菌性能進(jìn)行等級(jí)評(píng)定。

2、振動(dòng)燒瓶法

模仿人體的穿著條件，使細(xì)菌在振動(dòng)條件(300r/min)下與織物內(nèi)抗菌藥物接觸，振動(dòng)1-6h后經(jīng)過細(xì)菌培養(yǎng)數(shù)計(jì)算細(xì)菌減縮率，確定抗菌性能的大小。應(yīng)用該抗菌檢測(cè)方法時(shí)，檢測(cè)的樣品不僅適用于普通織物，還適用于凹凸不平的織物、有毛或羽毛的織物、粉末織物等。

(1)金黃色葡萄球菌(ATCC 6538)、大腸桿菌(8099)、白色念珠菌(ATCC 10231) 菌懸液(見2. 1.1.2)及根據(jù)抑菌劑特定用途所用的其他菌懸液。

(2)抑菌劑載體(5 mm直徑園形新華一號(hào)定性濾紙片， 經(jīng)壓力蒸汽滅菌處理后，置120C烤干2h，保存?zhèn)溆?。

(3)活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)所需器材(見2.1. 1.3)。

(4)微量移液器(5μ 1~50μ 1，可調(diào)式)。

(5)游標(biāo)卡尺。.

(6)營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基與沙堡瓊脂培養(yǎng)基

2.1.8. 2.3操作程序

(1)抑菌片的制備:對(duì)液體抑菌劑，取無菌并干燥的濾紙片。每片滴加實(shí)際使用濃度抑菌劑溶液20μ 1，然后將濾紙片平放于清潔的無菌平皿內(nèi)，開蓋置溫箱(37"C)中烤干，或置室溫下自然干燥后備用。溶出性抗(抑)菌產(chǎn)品，可直接制成直徑為5mm， 厚不超過4mm 圓片(塊)，每4片(塊)- -組。

(2)陰性對(duì)照樣片的制備:取無菌干燥濾紙片，每片滴加無菌燕餾水20μ 1, 干燥后備用。溶出性抗(抑)菌產(chǎn)品的陰性對(duì)照樣本，應(yīng)取同種材質(zhì)不含抑菌成份的樣品，制成與試驗(yàn)組大小相同的樣片(塊)。

(3)試驗(yàn)菌的接種:用無菌棉拭子蘸取濃度為5X 105cfu/ml ~ 5X 106cfu/ml試驗(yàn)菌懸液，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板表面均勻涂抹3次。每涂抹1次，平板應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)60°， 最后將棉拭子繞平板邊緣涂抹一周。 蓋好平皿，.置室溫干燥5min。.

(4)抑菌劑樣片貼放:每次試驗(yàn)貼放1個(gè)染菌平板，每個(gè)平板貼放4片試驗(yàn)樣片，1片陰性對(duì)照樣片，共5片。用無菌鑷子取樣片貼放于平板表面。各樣片中心之間相距25mm 以上，與平板的周緣相距15mm 以上。貼放好后，用無菌鑷子輕壓樣片，使其緊貼于平板表面。蓋好平皿，置37"C溫箱，培養(yǎng)16h~ 18h觀察結(jié)

果。用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌環(huán)的直徑(包括貼片)并記錄。試驗(yàn)重復(fù)3次。測(cè)量抑菌環(huán)時(shí)，應(yīng)選均勻而完全無菌生長(zhǎng)的抑菌環(huán)進(jìn)行。測(cè)量 其直徑應(yīng)以抑菌環(huán)外沿為界。