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高效液相色譜檢測組氨酸含量 經(jīng)驗豐富可全國送樣

實驗室地址: 浙江、上海
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發(fā)布時間: 2023-12-09 03:05
最后更新: 2023-12-09 03:05
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氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單元,具有極其重要的生理功能。組氨酸(L-Histidine,His或H),分子式C6H9N3O2,是存在于蛋白質(zhì)之中最普遍的20種氨基酸之一,一種堿性氨基酸,對成人為非必需對幼兒為必需氨基酸,現(xiàn)主要應用于醫(yī)藥工業(yè),是氨基酸輸液和綜合制劑的主要成分,為了進一步提高生產(chǎn)率改進生產(chǎn)工藝,應建立一種簡便的對生物制品中的組氨酸含量的檢測方法。

目前,氨基酸含量檢測主要應用氨基酸分析儀和高效液相色譜HPLC。氨基酸分析儀利用離子交換色譜,經(jīng)過吸附、穿透、擴散、離子交換、離子親和力等復雜的物理化學過程對氨基酸準確定量檢測。高效液相色譜HPLC技術(shù)分析氨基酸也是一種較為理想的氨基酸檢測方法,高效快速準確,逐步代替了氨基酸自動分析儀,實驗室分享一種利用反相高效液相色譜法檢測組氨酸含量的方法并通過全面的方法學驗證。

考慮到組氨酸不含生色基團,無法采用常規(guī)的紫外檢測器直接檢測,實驗條件中增加通過衍生劑,將氨基酸轉(zhuǎn)化為具有較強紫外或熒光吸收的衍生物。通過樣品制備、色譜柱選擇、HPLC條件優(yōu)化,對樣品進行分析,最后對結(jié)果數(shù)據(jù)進行分析處理,得到組氨酸的含量結(jié)果。色譜條件紫外檢測器檢測,波長為254nm,進樣體積為5μL,柱溫為25℃,流速為1.0ml/min,洗脫時間為35min,洗脫方式為梯度洗脫。

利用高效液相色譜HPLC的方法具有良好的專屬性、準確度、重復性、中間精密度、線性和耐用性,按照中國藥典中分析方法驗證指導原則和ICH協(xié)調(diào)三方指導原則Q2進行方法學驗證方法,符合驗收標準。是一種較為理想的檢測氨基酸的方法,能夠為組氨酸含量的檢測提供參考,隨著氨基酸的廣泛應用,對氨基酸的檢測分析水平也不斷提高,利用組氨酸含有的咪唑基,報道也可以采用離子色譜對其含量進行檢測。

利用高效液相色譜對組氨酸含量進行檢測是一項復雜的過程,需要嚴格的實驗條件和專業(yè)的操作技能。微源檢測實驗室采用高效液相色譜(HPLC)和液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法,可高效、精準的檢測組氨酸含量變化,為各科研院所、藥企、生物技術(shù)、化工領(lǐng)域等企業(yè)提供高效、準確的氨基酸及其代謝物檢測服務,滿足質(zhì)量控制和研發(fā)支持,如您有這方面的測試需求,歡迎致電咨詢!

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