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蛋白質(zhì)Pull-down

Pull-down實(shí)驗(yàn)又稱拉下實(shí)驗(yàn)，是一種體外親和純化技術(shù)，蛋白Pull-down技術(shù)可以提供一種誘餌蛋白來(lái)特異性識(shí)別配體蛋白質(zhì)，以達(dá)到富集、分離、純化某種配體蛋白質(zhì)的目的，是體外研究蛋白與蛋白相互作用的有力工具。誘餌蛋白的實(shí)質(zhì)是被親和試劑標(biāo)簽（如谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、組氨酸六肽、生物素）標(biāo)記的已知的蛋白。蛋白Pull-down可用于證實(shí)已知的蛋白或肽的相互作用，也可以用來(lái)發(fā)掘未知的蛋白或肽的相互作用。

蛋白質(zhì)Pull-down實(shí)驗(yàn)原理

蛋白質(zhì)Pull-down是將誘餌蛋白固定在某種固體基質(zhì)（如瓊脂糖）上，當(dāng)目標(biāo)蛋白或細(xì)胞、組織抽提液流經(jīng)該基質(zhì)時(shí)，可與該誘餌蛋白相互作用的配體蛋白被捕獲，通過(guò)改變洗脫液或洗脫條件回收被捕獲的蛋白，再利用蛋白質(zhì)印跡或質(zhì)譜方法檢測(cè)這種互作關(guān)系。

蛋白質(zhì)Pull-down技術(shù)是一種體外親和純化技術(shù)，在一定程度上不能真實(shí)的反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間的相互作用，因?yàn)樵隗w外相互作用的蛋白質(zhì)在正常生理?xiàng)l件下不一定會(huì)相互結(jié)合。

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