犬骨橋素(OPN) elisa試劑盒（科研實驗專用）操作步驟：

步驟一：使用前將所有試劑平衡至室溫并充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫以免加樣時加入大量的氣泡產生加樣上的誤差。步驟二：根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

步驟三：【加樣】加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37攝氏度溫育45分鐘。

步驟四：【洗滌】甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液振蕩30秒，甩去洗滌液用吸水紙拍干。重復此操作4次，也可以用洗板機洗滌。

步驟五：每孔加入100ul的HRP輕輕振蕩混勻37攝氏度溫育30分鐘。

步驟六：重復洗滌步驟。

步驟七：每孔加入底物A、B溶液各50ul，輕輕振蕩混勻，37攝氏度溫育5分鐘，避免光照。

步驟八：取出酶標板迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

步驟九：在450nm波長處測定各孔的OD值。

犬骨橋素(OPN) elisa試劑盒技術小提示：當混合或重溶蛋白溶液時，盡量避免起沫；為了避免交叉感染，配置不同濃度標準品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽；每次孵育時，請正確使用封板膠可保證結果的準確性；混合后的顯色底物在上板前應為無色，請避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍色；終止液上板順序應同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內顏色由藍變黃；若孔內有綠色，則表明孔內液體未混勻；請充分混合。