電穿孔是功能強(qiáng)大的將核酸、蛋白及其它分子導(dǎo)入多種細(xì)胞的高效技術(shù)。
通過高強(qiáng)度的電場作用,瞬時提高細(xì) 胞膜的通透性,從而吸收周圍介質(zhì)中的外源分子。
這種技術(shù)可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病 毒顆粒等導(dǎo)入原核和真核細(xì)胞內(nèi)。
電轉(zhuǎn)化相對其它物理和化學(xué)轉(zhuǎn)化方法,是一種有價值和有效的替代方法。
Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)的設(shè)計(jì),基于Bio-Rad 15 年來在電轉(zhuǎn)化技術(shù)上經(jīng)驗(yàn)積累,它提供指數(shù)波和方波波型選擇、 系統(tǒng)配置選擇及友好的用戶界面。
主要特點(diǎn)★ 指數(shù)波和方波波型確保所有細(xì)胞類型(原核及真核)均可獲得佳 的電轉(zhuǎn)化效果★ Bio-Rad 專利的* PulseTrac 電路和電弧保護(hù)設(shè)計(jì),確??芍貜?fù)性 并保護(hù)樣品★ 模塊化設(shè)計(jì)可根據(jù)研究需要選擇系統(tǒng)★ 用戶友好的數(shù)字化界面,具有直觀的編程以控制所有參數(shù), 包括附屬模塊的參數(shù)★ 包括人工操作、預(yù)設(shè)規(guī)程、用戶規(guī)程、一個優(yōu)化規(guī)程及其它先進(jìn) 功能等程序選擇* 美國專利4,750,100 和4,910,140。
指數(shù)波或方波脈沖選擇Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)可產(chǎn)生指數(shù)波和方波波型,使你選擇適合你細(xì)胞的波型與規(guī)程。
指數(shù)波和方波均能有效地用于電轉(zhuǎn)化及電融合。
電穿孔波型對不同類型細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率有很重要的影響。
左,指數(shù)衰變脈沖。
當(dāng)一個充電至電壓為V 0 的電容器放 電到細(xì)胞,加在細(xì)胞上的電壓隨時間以指數(shù)方式下降。
從 起始電壓下降到V0 / e 所需的時間稱為為時間常數(shù)τ, 一 種方便的脈沖時間表達(dá)方式。
右,方波脈沖。
放電到樣品后截斷電容器脈沖可產(chǎn)生方 波脈沖。
脈沖時間為細(xì)胞被放電的時間。
所有方波設(shè)備都 會產(chǎn)生細(xì)微的電壓下降。
這種電壓下降稱為脈沖下垂,并 以起始電壓的百分比計(jì)量。
PulseTrac 電路和電弧保護(hù)提供可靠的、可重復(fù)的和安全的性能Bio-Rad 獨(dú)創(chuàng)的專利微處理器控制電路能為任何規(guī)程提供可重復(fù)的結(jié)果,無論使用何種介質(zhì),它所產(chǎn)生的電壓 值可在全世界范圍內(nèi)測試。
PulseTrac 電路和電弧保護(hù):※ 確保電壓準(zhǔn)確地傳送到電擊杯※ 把CE 模塊中的低壓電容器**度從20% 提升到10%※ 便于電容器再校正,以保持**的脈沖指標(biāo),修正電容器隨著時間而發(fā)生的偏移※ 提供脈沖前樣品電阻測量※ 當(dāng)脈沖或電路中斷時,可安全地自動放電※ 降低電弧危險,保護(hù)設(shè)備及樣品用戶友好界面,便于編程和控制主單元上的圖形界面可控制包括任何連接的附屬模塊在內(nèi)的所有功能。
界面由一個通過功能鍵和字母數(shù)字鍵盤 操作的屏幕組成。
根據(jù)屏幕提示進(jìn)行簡便而直觀的編程。
屏幕用于編程和顯示儲存與設(shè)定的程序、運(yùn)行參數(shù)以及波 型。
規(guī)程包括:※ 人工編程以輸入或編輯方波或指數(shù)衰變脈沖的所有參數(shù)※ 輔助編程需要的時間常數(shù)※ 預(yù)設(shè)有適合常用細(xì)菌、真菌和哺乳動物細(xì)胞株的優(yōu)化程序※ 優(yōu)化規(guī)程※ 根據(jù)不同的波型選擇,顯示時間常數(shù)、實(shí)際電壓、脈沖間隔和脈沖時間等參數(shù)※ 儲存和調(diào)用前100 個實(shí)驗(yàn)的脈沖參數(shù)預(yù)優(yōu)化規(guī)程,可快速選擇程序這項(xiàng)功能為每個細(xì)胞株提供一組專用的預(yù)優(yōu)化參數(shù)。
提供以下細(xì)胞株的預(yù)設(shè)程序哺乳動物細(xì)菌真菌CHOEscherichia coliSaccharomyces cerevisiaeCOS-7Agrobacterium tumefaciensPichia pastoris3T3Pseudomo
nas aeruginosaCandida albicans293Staphylococcus aureusSchizosaccharomyces pombeHeLaBacillus cereusDictyostelium discoideumBHK21Streptococcus pyrogenesA549Lactobacillus plantarumCV1K562HL60JurkatHuT78 這些細(xì)胞株的詳細(xì)參數(shù)及制備電感受態(tài)細(xì)胞的詳細(xì)信息可查詢Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)指導(dǎo)手冊或 discover.bio-rad.com 網(wǎng)站。
選擇你所需要的系統(tǒng)Gene Pulser Xcell 是由一個主單元、2 個附屬模塊(CE 與PC 模塊)及ShockPod 電擊槽組成的模塊式電穿 孔系統(tǒng)。
CE 模塊與Gene Pulser Xcell 主單元配合使用可電轉(zhuǎn)化多數(shù)真核細(xì)胞(包括哺乳動物細(xì)胞和植物原生質(zhì) 體)。
PC 模塊建議用于細(xì)菌和真菌的電轉(zhuǎn)化,或其它需要在小體積和高電阻樣品上施加高電壓脈沖的應(yīng)用。
系統(tǒng)有 3 種組合。
Gene Pulser Xcell 選擇系統(tǒng):1、Gene Pulser Xcell 完全系統(tǒng)完全系統(tǒng)包括PC 模塊和CE 模塊,具有用指數(shù)波或方波脈沖轉(zhuǎn)化真核與原核細(xì)胞的完整功能。
2、Gene Pulser Xcell 真核系統(tǒng)真核系統(tǒng)由主單元及CE 模塊組成,可電轉(zhuǎn)化哺乳動物細(xì)胞和植物原生質(zhì)體。
CE 模塊具有25-3,275 μF 跨度,提供了一種通過增加脈沖時間常數(shù)來控制電路電容的方法。
對于方波脈沖,CE 模塊能提供從傳送方波脈沖到低電阻介質(zhì)所需的大電容。
3、Gene Pulser Xcell 微生物系統(tǒng)微生物系統(tǒng)由主單元及PC 模塊組成,可電轉(zhuǎn)化細(xì)菌和真菌,或其它需要在小體積和高電阻樣品上施加高電壓脈沖的應(yīng)用。
通過將電阻器與樣品并聯(lián)放置,PC 模塊可控制電路電阻,從而提供了一種減少指數(shù)衰變脈沖時間常數(shù)的方法。
ShockPod 電擊槽可更簡單快速地處理樣品創(chuàng)新的ShockPod 槽設(shè)計(jì)適合單手操作,可快速而簡便地單手操作一個電 擊杯。
只需抓住ShockPod 前部就能打開槽蓋。
電擊杯狹槽的設(shè)計(jì)可確保電擊 杯只能以正確的方向插入。
ShockPod 擁有安全的聯(lián)鎖裝置,避免ShockPod 打開時脈沖傳送到電擊杯。
【技術(shù)指標(biāo)】Gene Pulser Xcell 完全系統(tǒng)包括主單元、CE模塊、PC模塊 輸出波型:指數(shù)衰變或方波電壓: 10–3,000 V電容10–500 V, 25–3,275 μF , 25 μF 增量500–3,000 V, 10, 25, 50 μF電阻(并聯(lián))50–1,000 ? ,50 ? 增量,加無窮大樣品電阻10–2,500 V 內(nèi),小20 ?2,500–3,000 V 內(nèi),小600 ?方波時間10–500 V: 持續(xù)時間0.05–10 ms ,0.05 ms 增量;持續(xù)時間10–100 ms ,1 ms 增量,1–10 個脈沖,間隔0.1–10 s500–3,000 V:持續(xù)時間0.05-5 ms,0.05 ms 增量,1-2 個脈沖, 小間隔5sGene Pulser Xcell 真核系統(tǒng)包括主單元、CE 模塊; 輸出和其他規(guī)格除了無并聯(lián)電阻外,輸出等與完全系統(tǒng)相同Gene Pulser Xcell 微生物系統(tǒng)包括主元件、PC 模塊輸出波型:指數(shù)衰變或方波電壓:200–3,000 V10, 25, 50 μF50–1,000 ? 增量50 ? ,加無窮大200–2,500 V 內(nèi),小20 ?2,500–3,000 V 內(nèi),小600 ?持續(xù)時間0.05–5 ms , 0.05 ms 增量,1-2 個脈沖,小間隔5sGene Pulser Xcell 主單元放電電容常規(guī)輸入電壓100–120 VAC 或220–240 VAC, 50/60 Hz電源大240 W (在短放電過程中)工作環(huán)境溫度0–35°C, 濕度0–95% (無冷凝水)安全認(rèn)證EN61010, EMC EN61326 A 級安全認(rèn)證大小(W x D x H)主單元:31 x 30 x 14 cmCE 模塊: 31 x 28 x 9 cmPC 模塊: 31 x 28 x 5 cm重量主單元: 6.6 公斤CE 模塊: 3.1 公斤PC 模塊:1.9 公斤 【訂貨信息】目錄 #描述Systems165-2660Gene Pulser Xcell Total System, for mammalian and microbial cells, 100/240 V, 50/60 Hz, expo
nential and s delivery, includes main unit, CE module, PC module, ShockPod chamber, 15 sterile cuvettes (5 each of 0.1, 0.2, and 0.4 cm gap), instructions165-2661Gene Pulser Xcell Eukaryotic System, 100/240 V, 50/60 Hz, expo
nential (25–3,275 μF range) and s delivery, includes main unit, CE module, ShockPod chamber, 5 sterile cuvettes (0.4 cm gap), cuvette rack, instructions165-2662Gene Pulser Xcell Microbial System, 100/240 V, 50/60 Hz, expo
nential decay delivery, includes main unit, PC module, ShockPod chamber, 10 sterile cuvettes (5 each of 0.1 and 0.2 cm gap), cuvette rack, instructionsComponents165-2666Gene Pulser Xcell Main Unit, 100/240 V, 50/60 Hz165-2667Gene Pulser Xcell CE Module, 25–3,275 μF range co
ntrolled by main unit, includes integral leads165-2668Gene Pulser Xcell PC Module, 50–1,000 ohm range co
ntrolled by main unit, includes integral leads165-2669Gene Pulser Xcell ShockPod Cuvette Chamber, includes integral leads for co
nnection to Gene Pulser Xcell, Gene Pulser II, or MicroPulser electroporators更多詳細(xì)資料請登錄www.cbio21.com查詢