關鍵詞：TMT標記的定量磷酸化蛋白組學,蛋白質(zhì)組學,代謝組學,tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定,蛋白質(zhì)組學,代謝組學,tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定,蛋白質(zhì)組學,代謝組學,tmt,抗體測序,itraq,蛋白質(zhì)譜鑒定

TMT（Tandem Mass Tag）串聯(lián)質(zhì)量標簽是一種基于體外肽標記的蛋白質(zhì)定量技術，旨在使用串聯(lián)質(zhì)譜MS對不同樣品中的蛋白質(zhì)進行鑒定和定量。TMT定量技術將蛋白質(zhì)利用TMT試劑進行標記，所有TMT試劑標簽具有相同的質(zhì)量，由氨基反應基團、質(zhì)量平衡基團和質(zhì)量報告基團組成，其中質(zhì)量平衡基團和質(zhì)量報告基團的分子量各不相同。因此，被TMT標記的不同來源的蛋白肽段在一級質(zhì)譜中表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比；在二級質(zhì)譜中，通過剪切斷裂釋放出報告基團，由此得到離子峰強度與離子峰質(zhì)荷比，通過軟件結合相應數(shù)據(jù)庫對離子峰強度和質(zhì)荷比值進行分析，可以計算樣品蛋白的含量。

TMT技術可對多種蛋白樣品進行定量鑒定，包括各種翻譯后修飾蛋白，如磷酸化蛋白等。TMT標記的定量磷酸化蛋白組學即利用TMT標記定量技術對磷酸化蛋白進行定量分析,其定量方法與進行普通蛋白的原理都相同，只是由于在正常生理狀態(tài)下磷酸化修飾的水平較低，因此通常需要對酶切后的磷酸化肽段進行富集，如抗體富集、IMAC富集以及TiO2富集等，以提高磷酸化修飾肽段的豐度，保證質(zhì)譜檢測結果的靈敏度和準確性。

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