人甲基CpG結(jié)合蛋白2(MECP2) ELISA試劑盒技術(shù)提示： 1、混合蛋白溶液時，避免起泡。 2、加校準(zhǔn)品與樣本時，每個校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應(yīng)該懸臂加樣， 避免交叉污染。 3、合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。 4、使用自動洗板機(jī)時，加入一個 30 秒浸泡的步驟，可以提高檢測精度。 5、底物溶液為無色液體，保存過程中變?yōu)樗{(lán)色，代表底物溶液已經(jīng)失效，不得使用。 6、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍(lán)色底物產(chǎn)物，會瞬間變?yōu)辄S 色。 7、實(shí)驗(yàn)中，用剩的板條，應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。 8、所有液體組分，使用前充分搖勻，嚴(yán)格按照說明書標(biāo)明的時間、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫 育操作。

上海軒澤康生物ELISA試劑盒技術(shù)指南：【關(guān)于ELISA試驗(yàn)的穩(wěn)定性問題】

1. 做ELISA實(shí)驗(yàn)時，結(jié)果老是重復(fù)性不上，相同的材料和相同的操作方法做出的結(jié)果就截然不同，上午做時OD在1.5，下午做時就是0.9了，都沒有辦法下為什么會差異這么大呀？答：（1）多設(shè)平行空孔；請別人代勞，以判斷究竟是否操作問題。（2）對于活性非常高的包被物和酶標(biāo)記物，如果第、一次選擇的范圍恰好在其平臺位置邊緣。那么在重復(fù)的時候每次取樣帶來的微量誤差就很容易導(dǎo)致大的偏差了。特別時線性比較好的原料試劑，這個就很正常了。建議每次取樣的時候只使槍尖一點(diǎn)點(diǎn)位于液面下，以免吸嘴外面沾有少量抗原或者抗體或酶而使結(jié)果重復(fù)不上。

2.  酶不穩(wěn)定，有何高招？答：（1）保存濃度盡量高些。（2）可以添加牛血清蛋白等蛋白保護(hù)劑，以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。（3）加入50%甘油-20℃保存，避免反復(fù)凍融。（4）還可以加入防腐劑防止長菌（注意不能使用疊氮鈉，其對HRP活性有很大影響。（5）現(xiàn)在一些公司也有商品化的酶標(biāo)保護(hù)劑供應(yīng)，可以考慮一下。酶類的穩(wěn)定性與保存方法有很大的關(guān)系。干燥的制品一般比較穩(wěn)定，在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無明顯變化，貯藏要求簡單，只要將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)（內(nèi)裝有干燥劑）密封，保持0-4℃冰箱即可。液態(tài)穩(wěn)定性較差，貯藏時應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：1.樣品不能太稀，必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏，樣品太稀易降解、變性。2.一般需加入防腐劑和穩(wěn)定劑，酶常用的穩(wěn)定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等，也可加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性。鈣、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護(hù)作用。3.貯藏溫度要求低，避免反復(fù)凍融。