1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物90天經(jīng)口毒性試驗(yàn)的基本試驗(yàn)方法和技術(shù)要求。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于評(píng)價(jià)受試物的亞慢性毒性作用。

2 術(shù)語(yǔ)和定義

2.1 亞慢性毒性

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在不超過(guò)其壽命期限10%的時(shí)間內(nèi)(大鼠通常為90d),重復(fù)經(jīng)口接觸受試物后引起的健康損害效應(yīng)。

2.2 未觀察到有害作用劑量

通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)，以現(xiàn)有的技術(shù)手段和檢測(cè)指標(biāo)未觀察到任何與受試物有關(guān)的毒性作用的*大劑量。

2.3 *小觀察到有害作用劑量

在規(guī)定的條件下,受試物引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織形態(tài)、功能、生長(zhǎng)發(fā)育等有害效應(yīng)的*小作用劑量。

2.4 靶器官

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)由受試物引起明顯毒性作用的器官。

2.5 衛(wèi)星組

在毒性研究設(shè)計(jì)和實(shí)施中外加的動(dòng)物組,其處理和飼養(yǎng)條件與主要研究的動(dòng)物相似,用于試驗(yàn)中期或試驗(yàn)結(jié)束恢復(fù)期觀察和檢測(cè)，也可用于不包括在主要研究?jī)?nèi)的其他指標(biāo)及參數(shù)的觀察和檢測(cè)。

3 試驗(yàn)?zāi)康暮驮?/p>

確定在90d內(nèi)經(jīng)口重復(fù)接觸受試物引起的毒性效應(yīng)，了解受試物劑量-反應(yīng)關(guān)系、毒作用靶器官和可逆性,得出90d經(jīng)口*小觀察到有害作用劑量(LOAEL)和未觀察到有害作用劑量(NOAEL),初步確定受試物的經(jīng)口安全性,并為慢性毒性試驗(yàn)劑量、觀察指標(biāo)、毒性終點(diǎn)的選擇以及獲得“暫定的人體健康指導(dǎo)值”提供依據(jù)。

4 儀器和試劑

4.1 儀器/器械

實(shí)驗(yàn)室常用解剖器械、電子天平、生物顯微鏡、檢眼鏡、血生化分析儀、血液分析儀、凝血分析儀、尿液分析儀、心電圖掃描儀、離心機(jī)、病理切片機(jī)等。

4.2 試劑

甲醛、二甲苯、乙醇、蘇木素、伊紅、石蠟、血球分析儀稀釋劑、血生化分析試劑、凝血分析試劑、尿液分析試劑(或試紙)等。

5 試驗(yàn)方法

5.1 受試物

受試物應(yīng)使用原始樣品，若不能使用原始樣品，應(yīng)按照受試物處理原則對(duì)受試物進(jìn)行適當(dāng)處理。將受試物摻入飼料、飲用水或灌胃給予。

5.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

5.2.1 動(dòng)物選擇

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇應(yīng)符合GB14922.1和GB14922.2的有關(guān)規(guī)定。選擇已有資料證明對(duì)受試物敏感的動(dòng)物物種和品系，一般嚙齒類動(dòng)物**大鼠,非嚙齒類動(dòng)物**犬(通常選用BeagIe 犬)。大鼠周齡推薦不超過(guò)6周，體重50g~100g。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)每個(gè)性別動(dòng)物體重差異不應(yīng)超過(guò)平均體重的±20%,每組動(dòng)物數(shù)不少于20只,雌雄各半;若計(jì)劃試驗(yàn)中期觀察或試驗(yàn)結(jié)束做恢復(fù)期的觀察,應(yīng)增加動(dòng)物數(shù)(對(duì)照和高劑量增加衛(wèi)星組，每組10只，雌雄各半)。犬通常選用4個(gè)月～6個(gè)月的幼犬，一般不超過(guò)9個(gè)月，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)每個(gè)性別動(dòng)物體重差異不應(yīng)超過(guò)平均體重的±20%,每組動(dòng)物數(shù)不少于8只，雌雄各半;若計(jì)劃試驗(yàn)中間尸檢或試驗(yàn)結(jié)束做恢復(fù)期的觀察,應(yīng)增加動(dòng)物數(shù)(對(duì)照和高劑量增加衛(wèi)星組,每組4只,雌雄各半)。對(duì)照組動(dòng)物性別和數(shù)量應(yīng)與受試物組相同。

5.2.2 動(dòng)輸準(zhǔn)備

試驗(yàn)前大鼠在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房至少應(yīng)進(jìn)行3d～5d(犬7d～14d)環(huán)境適應(yīng)和檢疫觀察。

5.2.3 動(dòng)物飼養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件應(yīng)符合GB14925、飲用水應(yīng)符合GB5749、飼料應(yīng)符合GB14924的有關(guān)規(guī)定。試驗(yàn)期間動(dòng)物自由飲水和攝食,動(dòng)物推薦單籠飼養(yǎng),大鼠也可按組分性別分籠群飼,每籠動(dòng)物數(shù)(一般不超過(guò)3只)應(yīng)滿足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物*低需要的空間，以不影響動(dòng)物自由活動(dòng)和觀察動(dòng)物的體征為宜。試驗(yàn)期間每組動(dòng)物非試驗(yàn)因素死亡率應(yīng)小于10%,瀕死動(dòng)物應(yīng)盡可能進(jìn)行血液生化指標(biāo)檢測(cè)、大體解剖以及病理組織學(xué)檢查，每組生物標(biāo)本損失率應(yīng)小于10%。